Elektroforez: ne olduğu, ne için olduğu ve nasıl yapıldığı

İçerik

• Bu ne için
• Nasıl yapılır
• Elektroforez türleri
• 1. Hemoglobin elektroforezi
• 2. Protein elektroforezi

Elektroforez, molekülleri boyutlarına ve elektrik yüklerine göre ayırmak, böylece hastalıkların teşhisinin konulabilmesi, protein ekspresyonunun doğrulanabilmesi veya mikroorganizmaların tanımlanabilmesi amacıyla yapılan bir laboratuvar tekniğidir.

Elektroforez, laboratuvar rutininde ve araştırma projelerinde kullanılan basit ve düşük maliyetli bir prosedürdür. Elektroforezin amacına göre, örneğin bir tanıya ulaşmak için başka testler ve muayeneler yapılması gerekebilir.

Bu ne için

Elektroforez, basit ve düşük maliyetli bir teknik olduğu için hem araştırma projelerinde hem de tanıda farklı amaçlarla yapılabilmektedir.Böylece, elektroforez aşağıdakiler için yapılabilir:

• Araştırma projelerinde daha yaygın olan bu uygulama ile virüsleri, mantarları, bakterileri ve parazitleri tanımlayın;
• Babalık testi;
• Proteinlerin ifadesini kontrol edin;
• Örneğin lösemi teşhisinde yararlı olan mutasyonları tanımlayın;
• Orak hücre anemisinin teşhisinde yararlı olan dolaşımdaki hemoglobin tiplerini analiz edin;
• Kanda bulunan protein miktarını değerlendirin.

Elektroforezin amacına göre doktorun teşhisi tamamlaması için diğer tamamlayıcı testlerin yapılması gerekebilir.

Nasıl yapılır

Elektroforez gerçekleştirmek için, amaca bağlı olarak poliakrilamid veya agaroz olabilen jel, elektroforez tamponu ve teknesi, moleküler ağırlık işaretçisi ve ayrıca bir transillüminatör olarak da bilinen bir UV veya LED ışık ekipmanına ek olarak bir floresan boya gereklidir.

Jeli hazırladıktan sonra, popüler olarak tarak olarak adlandırılan jelde kuyucukların yapılması için belirli bir nesne yerleştirilmeli ve jelin sertleşmesine izin verilmelidir. Jel hazır olduğunda, maddeleri kuyucuklara uygulayın. Bunun için kuyulardan birine moleküler ağırlık işaretçisi, ne olduğu bilinen madde olan pozitif kontrol, reaksiyonun geçerliliğini garanti eden negatif kontrol ve analiz edilecek numuneler yerleştirilmelidir. Tüm numuneler bir floresan boya ile karıştırılmalıdır, çünkü bu şekilde transillüminatör üzerindeki bantları görselleştirmek mümkündür.

Örneklerle birlikte jel, spesifik tampon çözeltisini içeren elektroforez teknesine yerleştirilmeli ve daha sonra cihaz çalıştırılarak elektrik akımı ve dolayısıyla potansiyel farkı, ayırma partikülleri için bunlara göre önemlidir. yük ve boyut. Elektroforetik çalışma süresi prosedürün amacına göre değişir ve 1 saate kadar sürebilir.

Belirtilen süreden sonra, transillüminatörden geçen elektroforetik çalışmanın sonucunu görmek mümkündür. Jel UV veya LED ışığının altına yerleştirildiğinde, bantlama modelini görselleştirmek mümkündür: molekül ne kadar büyükse, göçü o kadar küçük olur, kuyuya yaklaşır, molekül ne kadar hafifse, göç potansiyeli o kadar büyük olur.

Reaksiyonun doğrulanması için, pozitif kontrol bantları görselleştirilmeli ve negatif kontrolde hiçbir şey görüntülenmemelidir, aksi takdirde bu kontaminasyonun bir göstergesidir ve tüm proses tekrarlanmalıdır.

Elektroforez türleri

Elektroforez, farklı amaçlar için gerçekleştirilebilir ve amacına göre, en yaygın olanı poliakrilamid ve agaroz olmak üzere çeşitli tipte jel kullanılabilir.

Mikroorganizmaları tanımlamak için elektroforez, araştırma laboratuvarlarında daha yaygındır, ancak teşhis amacıyla elektroforez, ana elektroforez türleri olan protein miktarındaki artışla gelişen hematolojik hastalıkları ve hastalıkları tanımlamak için kullanılabilir:

1. Hemoglobin elektroforezi

Hemoglobin elektroforezi, kanda dolaşan farklı hemoglobin türlerini tanımlamak için gerçekleştirilen ve hemoglobin sentezi ile ilgili hastalıkların varlığını belirlemeyi mümkün kılan bir laboratuvar tekniğidir. Hemoglobin tipi, normal modelle karşılaştırılabilen ve anormal hemoglobinlerin tanımlanmasına olanak tanıyan bir bant modeliyle, ideal olarak 8.0 ile 9.0 arasında spesifik bir pH'ta elektroforez yoluyla tanımlanır.

Ne için yapıldı: Hemoglobin elektroforezi, talasemiyi ayırt etmede yararlı olmanın yanı sıra, orak hücre anemisi ve hemoglobin C hastalığı gibi hemoglobin sentezi ile ilgili hastalıkları araştırmak ve teşhis etmek için yapılır. Hemoglobin elektroforezini nasıl yorumlayacağınızı öğrenin.

2. Protein elektroforezi

Protein elektroforezi, doktorun kanda dolaşan protein miktarını değerlendirmek ve böylece hastalıkları belirlemek için talep ettiği bir incelemedir. Bu inceleme, kanın diğer maddelerin yanı sıra proteinlerden oluşan kısmı olan plazmayı elde etmek için santrifüjlenen bir kan örneğinden yapılır.

Elektroforezden sonra, bir bant modeli görselleştirilebilir ve ardından, teşhis için temel olan proteinlerin her fraksiyonunun miktarının gösterildiği bir grafik görselleştirilebilir.

Ne için yapıldı: Protein elektroforezi, doktorun multipl miyelom, dehidratasyon, siroz, inflamasyon, karaciğer hastalığı, pankreatit, lupus ve hipertansiyon oluşumunu bant paternine ve muayene raporunda sunulan grafiğe göre araştırmasına olanak tanır.

Nasıl yapıldığını ve protein elektroforezinin sonucunun nasıl anlaşılacağını anlayın.