Gram boyama: nasıl yapılır ve ne içindir
İçerik
Gram boyama veya kısaca Gram, farklı boya ve solüsyonlara maruz kaldıktan sonra bakterileri hücre duvarlarının özelliklerine göre ayırt etmeyi amaçlayan hızlı ve basit bir tekniktir.
Böylelikle Gram boyama ile bakterilerin şekline ek olarak elde ettikleri rengi de kontrol etmek mümkündür ve bu sonuç, bakteri türlerinin belirlenmesi için diğer stratejilerin tanımlanması ve doktorun önleyici tedaviyi belirtmesi açısından önemlidir. mikroskobik olarak gözlemlenen özelliklere göre.
Gram boyama genellikle laboratuvarda rutin olarak yapılır ve bakteriyoskopi incelemesinin bir parçasıdır. Bakteriyoskopinin ne olduğunu ve nasıl yapıldığını anlayın.
Gram boyama nasıl yapılır
Gram boyama, enfeksiyonlardan sorumlu bakterileri tanımlamak için hızlı, pratik ve ucuz bir yöntemdir ve bu bakteri gruplarının belirli özellikleri bilindiğinden, ortaya çıkabilecek enfeksiyon için önleyici bir tedavi belirtmek için doktorlar için yararlıdır.
Gram boyama 7 ana adımda yapılır, ancak protokol laboratuvara bağlı olarak değişebilir:
- Kolonilerin homojenizasyonunu kolaylaştırmak için bir damla su ekleyerek slayt üzerine bakteri kolonileri yerleştirin;
- Biraz kurumasını bekleyin ve bıçak alevden hızla geçerek kurumayı kolaylaştırabilir, ancak sıcaklığa dikkat etmek önemlidir, çünkü eğer sıcaklık çok yüksekse, makinenin yapısında bir değişiklik olabilir. sonuca müdahale edebilecek bakteriler;
- Slayt kuruduğunda mor kristal boyayla kaplayın ve yaklaşık 1 dakika etki etmesine izin verin;
- Slaytı akan su ile yıkayın ve mavi boyayı sabitleme amacı olan lugol ile slaytı kapatın ve 1 dakika etki etmesine izin verin. Her iki bakteri türü de boya ve lugol tarafından oluşturulan kompleksi emerek maviye dönüşebilir;
- Ardından, slaytı akan suyla yıkayın ve% 95 alkol uygulayarak 30 saniye boyunca çalışmasını sağlayın. Alkol, gram negatif bakteriler oluşturan lipit zarını çözmekten ve böylece boya ile lugol arasında oluşan kompleksi uzaklaştırmaktan ve bu bakterilerin rengini bozmaktan sorumludur. Bununla birlikte, gram pozitif bakteriler söz konusu olduğunda, alkol gram pozitif bakterilerin hücre duvarını kurutarak gözeneklerin büzülmesine ve geçirimsiz hale gelmesine neden olur;
- Daha sonra tekrar akan suda yıkayın ve slaytı ikinci boya, fuksin veya safranin ile kapatın ve 30 saniye etki etmesini bekleyin;
- Ardından slaytı akan su altında yıkayın ve oda sıcaklığında kurumaya bırakın.
Slayt kuruduktan hemen sonra, bir damla daldırma yağı koymak ve slaytı mikroskop altında 100x objektifle gözlemlemek mümkündür, bu da bakteri varlığını veya yokluğunu, ayrıca maya ve epitel varlığını kontrol etmek mümkündür. hücreler.
Bu ne için
Gram boyama, bakterileri hücre duvarının özelliklerine ve genel morfolojisine göre ayırmak için ana hedefe sahiptir. Böylece, mikroskop altında gözlemlenen özelliklere göre bakteriler şu şekilde sınıflandırılabilir:
- Gram pozitif bakterilerdaha kalın hücre duvarına sahip oldukları ve lugole maruz kaldıklarında gözenekleri daraldığı için alkolle renk değiştirmemeleri nedeniyle mavi renkle görselleştirilenler;
- Gram negatif bakterilersafranin veya fuksin ile boyanarak, alkolle renk değiştirmesi nedeniyle pembe / mor renk ile görselleştirilen.
Bakterileri mikroskop altında inceledikten sonra, laboratuarda bakteri türlerini belirlemek için daha fazla test yapılması mümkündür. Bununla birlikte, Gram aracılığıyla ve kişinin sunduğu belirti ve semptomlarla ilişkilendirme yoluyla, doktor, daha spesifik muayenelerin sonucu elde edilene kadar önleyici bir tedavi önerebilir, çünkü bu şekilde bakteri çoğalması oranını azaltmak ve komplikasyonları önlemek mümkündür.